辽宁中医杂志

中药学论文_基于非靶向尿液代谢组学方法的气虚

文章摘要:目的:通过代谢组学方法,从生物标志物及代谢通路角度,探讨BALB/c-nu小鼠游泳力竭试验建立气虚模型的成模情况。方法:将BALB/c-nu小鼠随机分为正常组和气虚组,其中气虚组采用连续15 d尾部固定5%体质量金属游泳至力竭(鼻尖浸水>5 s)的方法建立气虚模型。利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF/MS)进行尿液代谢组学分析,流动相乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~1 min,5%~8%A;1~4 min,8%~8.5%A;4~5 min,8.5%~12%A;5~10 min,12%~40%A;10~12 min,40%~100%A;12~15 min,100%A;流速0.3 mL·min-1;进样量10 μL;电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式检测,扫描范围为m/z 50~1 000 Da。运用主成分分析(PCA),正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),人类代谢组数据库(HMDB)和MSE采集的高碰撞能量离子碎片信息,以及MS/MS串联离子碎片信息等鉴定潜在的生物标志物。采用京都基因和基因组数据库(KEGG)与MetaboAnalyst 5.0分析生物标志物的相应代谢通路及通路富集。结果:正常组和气虚组BALB/c-nu小鼠尿液内源性物质明显分离,并有24种具有显著差异的生物标志物。这些生物标志物涉及的代谢通路有三羧酸循环、糖酵解代谢、氨基酸代谢、脂肪酸代谢、嘧啶代谢、类固醇激素生物合成和色氨酸代谢等。其中,与能量相关的代谢通路有三羧酸循环、糖酵解代谢、氨基酸代谢、脂肪酸代谢、嘧啶代谢、类固醇激素生物合成。结论:通过尿液代谢组学考察,结合体征外观,成功评价了BALB/c-nu小鼠游泳力竭试验建立的气虚模型,同时也验证了气虚与能量代谢途径具有密切的相关性。

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