中药学论文_基于非靶向尿液代谢组学方法的气虚

文章摘要:目的：通过代谢组学方法，从生物标志物及代谢通路角度，探讨BALB/c-nu小鼠游泳力竭试验建立气虚模型的成模情况。方法：将BALB/c-nu小鼠随机分为正常组和气虚组，其中气虚组采用连续15 d尾部固定5%体质量金属游泳至力竭（鼻尖浸水>5 s）的方法建立气虚模型。利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF/MS）进行尿液代谢组学分析，流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱(0～1 min，5%～8%A；1～4 min，8%～8.5%A；4～5 min，8.5%～12%A；5～10 min，12%～40%A；10～12 min，40%～100%A；12～15 min，100%A；流速0.3 mL·min^-1；进样量10 μL；电喷雾离子源（ESI），正、负离子模式检测，扫描范围为m/z 50～1 000 Da。运用主成分分析（PCA），正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA），人类代谢组数据库（HMDB）和MS^E采集的高碰撞能量离子碎片信息，以及MS/MS串联离子碎片信息等鉴定潜在的生物标志物。采用京都基因和基因组数据库（KEGG）与MetaboAnalyst 5.0分析生物标志物的相应代谢通路及通路富集。结果：正常组和气虚组BALB/c-nu小鼠尿液内源性物质明显分离，并有24种具有显著差异的生物标志物。这些生物标志物涉及的代谢通路有三羧酸循环、糖酵解代谢、氨基酸代谢、脂肪酸代谢、嘧啶代谢、类固醇激素生物合成和色氨酸代谢等。其中，与能量相关的代谢通路有三羧酸循环、糖酵解代谢、氨基酸代谢、脂肪酸代谢、嘧啶代谢、类固醇激素生物合成。结论：通过尿液代谢组学考察，结合体征外观，成功评价了BALB/c-nu小鼠游泳力竭试验建立的气虚模型，同时也验证了气虚与能量代谢途径具有密切的相关性。

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